Departament Medycyny Laboratoryjnej, Szpital Ludowy Regionu Autonomicznego Guangxi Zhuang, Nanning, Chiny
Departament Medycyny Laboratoryjnej, Szpital Afiliowany Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Shandong, Jinan
Huang Huayi, Szkoła Medycyny Laboratoryjnej, Państwowy Uniwersytet Medyczny Youjiang, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, New Jersey, 07430, USA.
Departament Medycyny Laboratoryjnej, Szpital Ludowy Regionu Autonomicznego Guangxi Zhuang, Nanning, Chiny
Departament Medycyny Laboratoryjnej, Szpital Afiliowany Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Shandong, Jinan
Huang Huayi, Szkoła Medycyny Laboratoryjnej, Państwowy Uniwersytet Medyczny Youjiang, Baise, Guangxi, 533000, Mindray North America, Mahwah, New Jersey, 07430, USA.
Użyj poniższego linku, aby udostępnić pełną wersję tekstową tego artykułu znajomym i współpracownikom.Ucz się więcej.
Aby lepiej zrozumieć zmiany patologiczne COVID-19, sprzyja to klinicznemu postępowaniu z chorobą i przygotowaniu na falę podobnych pandemii w przyszłości.
Retrospektywnie przeanalizowano parametry hematologiczne 52 pacjentów z COVID-19 przyjętych do wyznaczonych szpitali.Dane analizowano za pomocą oprogramowania statystycznego SPSS.
Przed leczeniem podzbiory limfocytów T, całkowita liczba limfocytów, szerokość dystrybucji krwinek czerwonych (RDW), liczba eozynofilów i bazofilów były znacznie niższe niż po leczeniu, podczas gdy wskaźniki stanu zapalnego neutrofili, neutrofili i limfocytów Współczynnik (NLR) i białko C β-reaktywne ( Poziom CRP), jak również czerwonych krwinek (RBC) i hemoglobiny znacznie spadły po leczeniu.Podzbiory limfocytów T, całkowita liczba limfocytów i bazofilów u pacjentów w ciężkim i krytycznym stanie były znacznie niższe niż u pacjentów o umiarkowanym nasileniu.Neutrofile, NLR, eozynofile, prokalcytonina (PCT) i CRP są znacznie wyższe u pacjentów w ciężkim i krytycznym stanie niż u pacjentów o umiarkowanym nasileniu.CD3+, CD8+, całkowita liczba limfocytów, płytek krwi i bazofilów pacjentów powyżej 50. roku życia jest niższa niż poniżej 50. roku życia, natomiast neutrofile, NLR, CRP, RDW u pacjentów powyżej 50. roku życia są wyższe niż poniżej 50. roku życia.U pacjentów w ciężkim i krytycznym stanie istnieje dodatnia korelacja między czasem protrombinowym (PT), aminotransferazą alaninową (ALT) i aminotransferazą asparaginianową (AST).
Podzbiory limfocytów T, liczba limfocytów, RDW, neutrofile, eozynofile, NLR, CRP, PT, ALT i AST są ważnymi wskaźnikami w postępowaniu, szczególnie w przypadku ciężkich i krytycznie chorych pacjentów z COVID-19.
Pandemia choroby koronawirusowej 2019 (COVID-19) wywołana przez nowy typ koronawirusa wybuchła w grudniu 2019 r. i szybko rozprzestrzeniła się na całym świecie.1-3 Na początku epidemii skoncentrowano się na objawach i epidemiologii w połączeniu z tomografią komputerową w celu obrazowania pacjentów 4 i 5, a następnie zdiagnozowano pozytywne wyniki amplifikacji nukleotydów.Jednak później znaleziono różne patologiczne uszkodzenia w różnych narządach.6-9 Coraz więcej dowodów wskazuje, że zmiany patofizjologiczne COVID-19 są bardziej skomplikowane.Atak wirusa powoduje uszkodzenie wielu narządów i nadmierną reakcję układu odpornościowego.Zaobserwowano wzrost poziomu cytokin w surowicy i pęcherzykach płucnych oraz białek odpowiedzi zapalnej7, 10-12, a u krytycznie chorych pacjentów stwierdzono limfopenię i nieprawidłowe podzbiory limfocytów T.13, 14 Doniesiono, że stosunek neutrofili do limfocytów stał się użytecznym wskaźnikiem do rozróżniania złośliwych i łagodnych guzków tarczycy w praktyce klinicznej.15 NLR może również pomóc odróżnić pacjentów z wrzodziejącym zapaleniem jelita grubego od zdrowych osób z grupy kontrolnej.16 Odgrywa również rolę w zapaleniu tarczycy i jest związany z cukrzycą typu 2.17, 18 RDW jest markerem erytrocytozy.Badania wykazały, że pomaga rozróżniać guzki tarczycy, diagnozować reumatoidalne zapalenie stawów, dyskopatię lędźwiową i zapalenie tarczycy.19-21 CRP jest uniwersalnym predyktorem stanu zapalnego i był badany w wielu przypadkach.22 Niedawno odkryto, że NLR, RDW i CRP są również zaangażowane w COVID-19 i odgrywają ważną rolę w diagnostyce i prognozowaniu choroby.11, 14, 23-25 Dlatego wyniki badań laboratoryjnych są ważne dla oceny stanu pacjenta i podejmowania decyzji dotyczących leczenia.Przeanalizowaliśmy retrospektywnie parametry laboratoryjne 52 pacjentów z COVID-19, którzy byli hospitalizowani w wyznaczonych szpitalach w południowych Chinach, zgodnie z ich stanem przed i po leczeniu, ciężkością i wiekiem, aby lepiej zrozumieć zmiany patologiczne choroby i pomóc w przyszłym postępowaniu klinicznym COVID-19 .
W badaniu tym przeprowadzono retrospektywną analizę 52 pacjentów z COVID-19 przyjętych do wyznaczonego szpitala Nanning Fourth Hospital w okresie od 24 stycznia 2020 r. do 2 marca 2020 r. Wśród nich 45 było w stopniu umiarkowanym, a 5 w stanie krytycznym.Na przykład wiek waha się od 3 miesięcy do 85 lat.Pod względem płci było 27 mężczyzn i 25 kobiet.Pacjent ma objawy takie jak gorączka, suchy kaszel, zmęczenie, ból głowy, duszność, zatkany nos, katar, ból gardła, bóle mięśni, biegunka i bóle mięśni.Tomografia komputerowa wykazała, że płuca są niejednolite lub matowe, co wskazuje na zapalenie płuc.Diagnozuj zgodnie z 7. edycją chińskich wytycznych dotyczących diagnostyki i leczenia COVID-19.Potwierdzone przez wykrywanie wirusowych nukleotydów metodą qPCR w czasie rzeczywistym.Zgodnie z kryteriami diagnostycznymi pacjentów podzielono na grupy: umiarkowaną, ciężką i krytyczną.W umiarkowanych przypadkach u pacjenta rozwija się gorączka i zespół oddechowy, a wyniki badań obrazowych wykazują wzorce zapalenia płuc.Jeśli pacjent spełnia którekolwiek z poniższych kryteriów, diagnoza jest poważna: (a) niewydolność oddechowa (częstość oddechów ≥30 oddechów/min);(b) spoczynkowe saturacja krwi palca ≤93%;(c) ciśnienie tlenu tętniczego (PO2))/frakcja wdechowa O2 (Fi O2) ≤300 mm Hg (1 mm Hg = 0,133 kPa).Jeśli pacjent spełnia którekolwiek z poniższych kryteriów, diagnoza jest poważna: (a) niewydolność oddechowa wymagająca wentylacji mechanicznej;b) wstrząs;(c) niewydolność innych narządów, która wymaga leczenia na oddziale intensywnej terapii (OIOM).Zgodnie z powyższymi kryteriami, 52 pacjentów rozpoznano jako ciężko chore w 2 przypadkach, ciężko chore w 5 przypadkach i średnio chore w 45 przypadkach.
Wszyscy pacjenci, w tym pacjenci w umiarkowanym, ciężkim i krytycznym stanie, są leczeni zgodnie z następującymi podstawowymi procedurami: (a) Ogólne leczenie uzupełniające;(b) Terapia przeciwwirusowa: lopinawir/rytonawir i α-interferon;(c) Dawka tradycyjnej medycyny chińskiej może być dostosowana do stanu pacjenta.
Badanie to zostało zatwierdzone przez Komisję Rewizyjną Instytutu Badawczego Czwartego Szpitala Nanning i zostało wykorzystane do zebrania informacji o pacjentach.
Analiza hematologiczna krwi obwodowej: rutynową analizę hematologiczną krwi obwodowej przeprowadza się na analizatorze hematologicznym Mindray BC-6900 (Mindray) i analizatorze hematologicznym Sysmex XN 9000 (Sysmex).Próbkę krwi z antykoagulantem kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA) na czczo pobrano rano po przyjęciu pacjenta do szpitala.Ocena zgodności obu analizatorów krwi została zweryfikowana zgodnie z laboratoryjnymi procedurami kontroli jakości.W analizie hematologicznej uzyskuje się liczbę i różnicowanie białych krwinek (WBC), czerwonych krwinek (RBC) i wskaźnik wraz z wykresami punktowymi i histogramami.
Cytometria przepływowa subpopulacji limfocytów T: Cytometr przepływowy BD (Becton, Dickinson and Company) FACSCalibur zastosowano do analizy metodą cytometrii przepływowej w celu analizy subpopulacji komórek T.Analizuj dane za pomocą oprogramowania MultiSET.Pomiar został wykonany zgodnie ze standardowymi procedurami operacyjnymi i instrukcjami producenta.Użyj probówki do pobierania krwi z antykoagulantem EDTA, aby pobrać 2 ml krwi żylnej.Delikatnie wymieszaj próbkę, obracając kilkakrotnie probówkę, aby zapobiec kondensacji.Po pobraniu próbki jest ona wysyłana do laboratorium i analizowana w ciągu 6 godzin w temperaturze pokojowej.
Analiza immunofluorescencyjna: Białko C-reaktywne (CRP) i prokalcytonina (PCT) były analizowane bezpośrednio po zakończeniu analizy przy użyciu próbek krwi analizowanych hematologicznie i analizowane w analizatorze immunofluorescencyjnym FS-112 (Wondfo Biotech Co., LTD.) na analiza.) Postępuj zgodnie z instrukcjami producenta i normami procedur laboratoryjnych.
Analizuj aminotransferazę alaninową (ALT) i aminotransferazę asparaginianową (AST) w analizatorze chemicznym HITACHI LABOSPECT008AS (HITACHI).Czas protrombinowy (PT) analizowano na analizatorze STAGO STA-R Evolution (Diagnostica Stago).
Ilościowa reakcja łańcuchowa polimerazy z odwrotną transkrypcją (RT-qPCR): Do wykonania RT-qPCR w celu wykrycia SARS-CoV-2 użyj szablonów RNA wyizolowanych z wymazów z nosogardzieli lub wydzielin z dolnych dróg oddechowych.Kwasy nukleinowe rozdzielano na platformie do automatycznego rozdzielania kwasów nukleinowych SSNP-2000A (Bioperfectus Technologies).Zestaw do wykrywania został dostarczony przez Sun Yat-sen University Daan Gene Co., Ltd. i Shanghai BioGerm Medical Biotechnology Co., Ltd. Cykl termiczny przeprowadzono na termocyklerze ABI 7500 (Applied Biosystems).Wyniki testów nukleozydów wirusowych definiuje się jako dodatnie lub ujemne.
Do analizy danych wykorzystano oprogramowanie SPSS w wersji 18.0;Zastosowano test t dla prób sparowanych, test t dla prób niezależnych lub test U Manna-Whitneya, a wartość P < 0,05 uznano za istotną.
Pięciu pacjentów w stanie krytycznym i dwóch pacjentów w stanie krytycznym było starszych niż w grupie umiarkowanej (69,3 vs 40,4).Szczegółowe informacje dotyczące 5 pacjentów w stanie krytycznym i 2 pacjentów w stanie krytycznym przedstawiono w tabelach 1A i B. Pacjenci w stanie ciężkim i krytycznym mają zwykle niską liczbę podzbiorów limfocytów T i całkowitą liczbę limfocytów, ale liczba białych krwinek jest z grubsza prawidłowa, z wyjątkiem pacjentów z podwyższonym poziomem białych krwinek (11,5 × 109/l).Neutrofile i monocyty są również zwykle wysokie.Wartości PCT, ALT, AST i PT w surowicy 2 pacjentów w stanie krytycznym i 1 pacjenta w stanie krytycznym były wysokie, a wartości PT, ALT, AST 1 pacjenta w stanie krytycznym i 2 pacjentów w stanie krytycznym były skorelowane dodatnio.Prawie wszystkich 7 pacjentów miało wysoki poziom CRP.Eozynofile (EOS) i bazofile (BASO) są zwykle niskie u pacjentów w stanie krytycznym i krytycznie chorych (Tabela 1A i B).Tabela 1 zawiera opis normalnego zakresu parametrów hematologicznych w chińskiej populacji dorosłych.
Analiza statystyczna wykazała, że przed leczeniem limfocyty T CD3+, CD4+, CD8+, całkowita liczba limfocytów, szerokość dystrybucji RBC (RDW), eozynofile i bazofile były znacznie niższe niż po leczeniu (p = 0,000, 000, 000, 0,012, . 04, .000 i .001).Wskaźniki stanu zapalnego neutrofile, stosunek neutrofili do limfocytów (NLR) i CRP przed leczeniem były istotnie wyższe niż po leczeniu (odpowiednio P = 0,004, 0,011 i 0,017).Hb i RBC zmniejszyły się znacząco po leczeniu (P = 0,032, 0,026).PLT wzrosła po leczeniu, ale nie była istotna (P = 0,183) (Tabela 2).
Podzbiory limfocytów T (CD3+, CD4+, CD8+), całkowita liczba limfocytów i bazofilów u pacjentów w ciężkim i krytycznym stanie były znacznie niższe niż u pacjentów o umiarkowanym nasileniu (p = 0,025, 0,048, 0,027, 0,006 i 0,046).Poziomy neutrofili, NLR, PCT i CRP u pacjentów w ciężkim i krytycznym stanie były znacznie wyższe niż u pacjentów umiarkowanych (odpowiednio P = 0,005, 0,002, 0,049 i 0,002).Pacjenci ciężko i krytycznie chorzy mieli niższy PLT niż pacjenci umiarkowani;różnica nie była jednak istotna statystycznie (tab. 3).
CD3+, CD8+, całkowita liczba limfocytów, płytek krwi i bazofilów u pacjentów w wieku powyżej 50 lat była istotnie niższa niż u pacjentów w wieku poniżej 50 lat (odpowiednio p = 0,049, 0,018, 0,019, 0,010 i 0,039), podczas gdy Liczba neutrofili u pacjentów w wieku 50 lat, wskaźnik NLR, poziom CRP i RDW były istotnie wyższe niż u pacjentów poniżej 50. roku życia (odpowiednio p = 0,0191, 0,015, 0,009 i 0,010) (tab. 4).
COVID-19 jest spowodowany infekcją koronawirusem SARS-CoV-2, który po raz pierwszy pojawił się w Wuhan w Chinach w grudniu 2019 r. Epidemia SARS-CoV-2 szybko rozprzestrzeniła się później i doprowadziła do globalnej pandemii.1-3 Ze względu na ograniczoną wiedzę na temat epidemiologii i patologii wirusa, śmiertelność na początku epidemii jest wysoka.Chociaż nie ma leków przeciwwirusowych, dalsze postępowanie i leczenie COVID-19 uległo znacznej poprawie.Jest to szczególnie prawdziwe w Chinach, gdzie terapie uzupełniające są połączone z tradycyjną medycyną chińską w leczeniu wczesnych i umiarkowanych przypadków.26 pacjentów z COVID-19 skorzystało z lepszego zrozumienia zmian patologicznych i parametrów laboratoryjnych choroby.choroba.Od tego czasu śmiertelność spadła.W niniejszym raporcie nie było zgonów wśród 52 analizowanych przypadków, w tym 7 pacjentów w ciężkim i krytycznym stanie (tab. 1A i B).
Obserwacje kliniczne wykazały, że większość pacjentów z COVID-19 ma zmniejszoną liczbę limfocytów i subpopulacji komórek T, które są związane z ciężkością choroby.13, 27 W tym raporcie stwierdzono, że limfocyty T CD3+, CD4+, CD8+, całkowita liczba limfocytów, RDW przed leczeniem, eozynofile i bazofile były znacznie niższe niż po leczeniu (P = 0,000, 000, 000, 0,012, .04, .000 i .001).Nasze wyniki są podobne do poprzednich raportów.Doniesienia te mają znaczenie kliniczne w monitorowaniu ciężkości COVID-19,8, 13, 23-25, 27, podczas gdy wskaźniki stanu zapalnego granulocytów obojętnochłonnych, stosunek granulocytów obojętnochłonnych do limfocytów (NLR) i CRP po leczeniu przed leczeniem (P = 0,004, ). 011 i 0,017), które zostały zauważone i zgłoszone wcześniej u pacjentów z COVID-19.Dlatego parametry te uważa się za przydatne wskaźniki leczenia COVID-19,8.Po leczeniu poziom hemoglobiny i czerwonych krwinek uległ znacznemu zmniejszeniu (P = 0,032, 0,026), co wskazuje, że pacjent miał anemię podczas leczenia.Po leczeniu zaobserwowano wzrost PLT, ale nie był on istotny (P = 0,183) (Tabela 2).Uważa się, że zmniejszenie liczby limfocytów i subpopulacji komórek T jest związane z wyczerpaniem komórek i apoptozą, gdy gromadzą się w miejscach zapalnych, które zwalczają wirusa.Lub mogły zostać zużyte przez nadmierne wydzielanie cytokin i białek zapalnych.8, 14, 27-30 Jeśli podzbiory limfocytów i limfocytów T są stale niskie, a stosunek CD4+/CD8+ wysoki, rokowanie jest złe.29 W naszej obserwacji limfocyty i podzbiory limfocytów T wyzdrowiały po leczeniu, a wszystkie 52 przypadki zostały wyleczone (tab. 1).Wysokie poziomy neutrofili, NLR i CRP obserwowano przed leczeniem, a następnie znacząco spadły po leczeniu (odpowiednio P = 0,004, 0,011 i 0,017) (Tabela 2).Wcześniej opisano funkcję podzbiorów komórek T w infekcji i odpowiedzi immunologicznej.29, 31-34
Ponieważ liczba pacjentów w ciężkim i krytycznym stanie jest zbyt mała, nie przeprowadziliśmy analizy statystycznej parametrów pomiędzy pacjentami w ciężkim i krytycznym stanie oraz umiarkowanymi pacjentami.Podzbiory limfocytów T (CD3+, CD4+, CD8+) i całkowita liczba limfocytów u pacjentów w ciężkim i krytycznym stanie są znacznie niższe niż u pacjentów o umiarkowanym nasileniu.Poziomy neutrofili, NLR, PCT i CRP u pacjentów w ciężkim i krytycznym stanie były znacznie wyższe niż u pacjentów umiarkowanych (odpowiednio P = 0,005, 0,002, 0,049 i 0,002) (Tabela 3).Zmiany parametrów laboratoryjnych są związane z ciężkością COVID-19.35.36 Przyczyna bazofilii jest niejasna;może to być spowodowane spożyciem pokarmu podczas walki z wirusem w miejscu infekcji podobnym do limfocytów.35 Badanie wykazało, że pacjenci z ciężkim COVID-19 również mieli zmniejszoną liczbę eozynofili;14 Jednak nasze dane nie wykazały, że zjawisko to może być spowodowane niewielką liczbą ciężkich i krytycznych przypadków zaobserwowanych w badaniu.
Co ciekawe, odkryliśmy, że u pacjentów ciężko i krytycznie chorych istnieje dodatnia korelacja między wartościami PT, ALT i AST, co wskazuje, że w wyniku ataku wirusa wystąpiło uszkodzenie wielu narządów, jak wspomniano w innych obserwacjach.37 Dlatego mogą stanowić nowe przydatne parametry do oceny odpowiedzi i rokowania na leczenie COVID-19.
Dalsza analiza wykazała, że CD3+, CD8+, całkowita liczba limfocytów, płytek krwi i bazofilów u pacjentów w wieku powyżej 50 lat była znacznie niższa niż u pacjentów w wieku poniżej 50 lat (P = P = 0,049, 0,018, 0,019, 0,010 i). 039), podczas gdy poziomy neutrofili, NLR, CRP i RBC RDW u pacjentów powyżej 50. roku życia były istotnie wyższe niż u pacjentów poniżej 50. roku życia (P = 0,0191, 0,015, 0,009 i 0,010 , odpowiednio) (Tabela 4).Wyniki te są podobne do poprzednich raportów.14, 28, 29, 38-41 Zmniejszenie subpopulacji limfocytów T i wysoki stosunek limfocytów T CD4+/CD8+ są związane z ciężkością choroby;starsze przypadki bywają cięższe;dlatego więcej limfocytów zostanie zużytych w odpowiedzi immunologicznej lub poważnie uszkodzonych.Podobnie, wyższy RBC RDW wskazuje, że u tych pacjentów rozwinęła się anemia.
Wyniki naszych badań potwierdzają również, że parametry hematologiczne mają duże znaczenie dla lepszego zrozumienia zmian kliniczno-patologicznych pacjentów z COVID-19 oraz dla poprawy kierowania leczeniem i rokowania.
Liang Juanying i Nong Shaoyun zebrali dane i informacje kliniczne;Jiang Liejun i Chi Xiaowei przeprowadzili analizę danych;Dewu Bi, Jun Cao, Lida Mo i Xiaolu Luo przeprowadzili rutynową analizę;Huang Huayi był odpowiedzialny za koncepcję i pisanie.
Sprawdź pocztę e-mail, aby uzyskać instrukcje dotyczące resetowania hasła.Jeśli nie otrzymasz wiadomości e-mail w ciągu 10 minut, Twój adres e-mail może nie być zarejestrowany i może być konieczne utworzenie nowego konta Wiley Online Library.
Jeśli adres pasuje do istniejącego konta, otrzymasz e-mail z instrukcjami dotyczącymi odzyskania nazwy użytkownika
Czas publikacji: 22 lipca-2021